Vad är ett serum ELISA?

September 8

Serumenzymkopplad immunosorbentanalys (serum-ELISA) är en metod som används för att bestämma mängden av en biologisk substans i ett serumprov genom att förlita sig på den specifika interaktionen mellan ett antigen och en antikropp. Exempel på biologiska ämnen av intresse inkluderar en antikropp producerad som svar på en viral infektion, såsom en antikropp mot humant immunbristvirus (HIV), eller till ett hormon som indikerar graviditet, såsom humant koriongonadotropin (hCG), eller till en autoimmun antikropp framställd i reumatoid artrit, såsom reumatoid faktor. I allmänhet finns det en direkt analys, som använder en specifik antikropp för att detektera närvaron av antigen i ett serumprov, och en indirekt analys, som använder ett antigen för att bestämma närvaron av antikroppar i ett serumprov.

I den direkta serum-ELISA, är ett prov som innehåller en okänd mängd antigen fäst vid en orörlig yta, såsom ett reaktionsrör eller en mikrotiterplatta, och inkuberas med en specifik antikropp som är kemiskt kopplat till ett enzym. Omvänt, i den indirekta serum-ELISA, är ett känt antigen fäst vid en orörlig yta och därefter inkuberas med serumprovet som innehåller en okänd mängd antikropp. Den antigenspecifik antikropp i serumprovet förväntas binda tätt till det immobiliserade antigenet, medan icke-specifika antikroppar avlägsnas i de följande tvättningsstegen. I allmänhet är den orörliga ytan behandlas med en andra antikropp som känner igen den icke varierande regionen av alla antikroppar, och som är kemiskt kopplad till ett enzym. I både den direkta och indirekt ELISA, det sista steget består av tillsats av ett enzymspecifikt substrat, initiering av en reaktion som producerar en mätbar signal som är direkt proportionell mot mängden antigen eller antikropp närvarande i serumprovet.

Serumet ELISA är ett brett använt test för flera skäl. Viktigast anses det ett pålitligt kliniskt test på grund av specificiteten av antigen-antikropp interaktion, och känsligheten för denna analys möjliggör detektion av biologiska ämnen vid extremt låga koncentrationer i serum. Den är utformad för utvärdering av ett stort antal prover på samma gång, och så används ofta i storskaliga operationer, såsom screening av blodgivarprover för närvaron av HIV-antikroppar. Dessutom ELISA kit som mäter ofta analyserade antikroppar och antigener är kommersiellt tillgängliga för användning i kliniska eller forskningsmiljöer, och lämpligen innehålla alla nödvändiga reagenser för att utföra en fullständig experiment.

Ett växande område av studien innebär tillämpning av serum-ELISA-teknik på området cytokin detektering. Cytokiner är lösliga proteinmolekyler som utsöndras av immunsystemet som ofta är involverade i inflammatoriska processer; cytokinnivåer är därför informativa beträffande sjukdomstillstånd associerade med kronisk inflammation, såsom hjärtsjukdomar, autoimmuna sjukdomar, och matsmältningssjukdomar. Man tror att bedömningen av cytokinnivåer kanske kan skilja mellan inflammatoriska tarmsjukdomar, såsom Crohnâ € s sjukdom och ulcerös kolit, och kan så småningom kunna förutse utfallet i hjärtsjukdom och reumatoid artrit.

  • ELISA kit som mäter ofta analyserade antikroppar och antigener är kommersiellt tillgängliga för användning i kliniska eller forskningsmiljöer.
  • Blod serum är synlig när ett blodprov lämnas att stå under några timmar.