Vad är Western Blot antikroppar?

May 26

Western blot-antikroppar är stora Y-formade proteiner, eller immunoglobuliner, framställda för användning i Western blot-immunoanalys, att ett test detektera ett associerat protein i en vävnadskultur. Många företag är specialiserade på att producera och tillhandahålla antikroppar mot labb som använder Western blot-metoden. Det finns två typer av Western blot-antikroppar som kan produceras i labbet: monoklonala och byclonal. Förfarandet och typen av antikropp som produceras är beroende av hur antikroppen återger naturligt i värdkroppen. Under Western blot testning, är en process som kallas gelelektrofores används för att separera proteiner som är inhemska på vävnadsprovet från riktade Western blot-antikroppar, vilket leder till positiv identifiering.

Nästan alla ämnen kan användas för att producera en monoklonal antikropp som kommer att binda till dess besläktat protein i en Western blot-kultur. Polyklonala antikroppar produceras i mycket av samma sätt, men processen är mer komplicerad eftersom antikropparna måste skördas från immunresurser B-cells stället för att helt enkelt klonas från en förälder cell. Den växande tekniken för att producera immunglobulin från olika ämnen anses vara ett ovärderligt verktyg i biokemi, molekylärbiologi och medicin. Western blot-analys kan upptäcka de proteiner associerade med HIV, borrelia, och Creutzfeldt-Jakobs sjukdom-galna ko sjukdoms-, vilket leder till att läkarna ska kunna göra en definitiv diagnos tidigare under sjukdomsförloppet. Utöver dessa program, kan kriminaltekniska också använda Western blot antikroppsteknologi för att identifiera blod eller annan ämnesprover på en brottsplats.

Oavsett dess tillämpning, processen att identifiera en riktad protein i ett vävnadsprov börjar med att återge en mängd av antikroppen från en känd källa. Monoklonala antikroppar kan produceras från befintliga kulturen, men processen att producera polyklonala antikroppar är betydligt mer tidskrävande. Processen involverar typiskt att injicera ett värddjur, som en mus eller get, med antingen inaktiva eller levande partikelformig, vid vilken punkt djurets B-lymfocyter producerar immunoglobuliner som är specifika för antigenet. Därefter detergenter och buffertar tillsättas till provet som kommer att förhindra nedbrytning av immunoglobulinerna av några nativa enzymer, och gelelektrofores användes för att separera proteiner genom molekylvikt eller isoelektrisk laddning. Western blot-antikroppar är nu redo att genomgå "blotting" process, vilket är överföringen av antikroppar mot ett membran samtidigt ta del av de specifika blot mönster som produceras under överföringen som är unika för det protein som identifierats.

  • Western blot antikroppsteknologi kan användas för att identifiera brottsplatsprover.